大肠杆菌O157∶H7荧光微球免疫层析试纸条的研制

• 作者: 刘成伟 刘春梅 孙吉昌 游兴勇 熊勇华 解泉源 赖卫华 邓省亮 魏华
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 大肠杆菌O157∶H7 荧光微球 免疫层析法 试纸条
• 年，卷（期）: 2013,（16）
• 所属期刊栏目: 技术应用
• 页码范围: 353-357
• 页数: 5页
• 分类号: TS207.3
• 字数: 5016字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201316072

摘要

目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157∶H7荧光微球免疫层析试纸条法.方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157∶H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157∶H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157∶H7荧光微球免疫层析试纸条.结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果.制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157∶H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL.试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应.结论:大肠杆菌O157∶H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段.