HepG2细胞电转染条件的优化

• 作者: 何燕 单可人 官志忠 张婷 张禾璇 王婵娟
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 电转染 HepG2细胞 转染效率 pcDNA3.1-EGFP
• 年，卷（期）: 2013,（42）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4,8
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2013.42.001

摘要

目的 优化HepG2细胞电转染条件,进一步提高HepG2细胞的转染效率.方法 采用电穿孔方法将pcDNA3.1-EGFP导入HepG2细胞中,在500 μL电转染体系中,在不同电场强度、细胞数目、脉冲频率、脉冲时间、电转质粒数目、电转缓冲液、培养基血清浓度条件下,分别将pcDNA3.1-EGFP质粒电转染HepG2细胞,检测不同条件下细胞存活率和转染率.结果 电转前4℃孵育电转体系混合液10 min,方波电转条件在1个电脉冲、电压270V、细胞数为2×106个、质粒20 μg、脉冲时间20 ms、电转缓冲液为优化缓冲液、电转后置于37℃、含15％ FBS的DMEM高糖培养基中培养48 h,可获得高转染率(60.68±1.87)％.结论 优化电穿孔法的电转染条件能够有效提高HepG2细胞的电转染效率.本研究为外源基因电转染HepG2细胞提供了可靠的试验参数.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	官志忠	贵阳医学院分子生物学重点实验室	177	1172	16.0	24.0
2	单可人	贵阳医学院分子生物学重点实验室	104	528	12.0	16.0
3	何燕	贵阳医学院分子生物学重点实验室	51	216	9.0	12.0
4	张婷	贵阳医学院分子生物学重点实验室	40	129	5.0	9.0
5	王婵娟	贵阳医学院分子生物学重点实验室	17	24	3.0	4.0
6	张禾璇	贵阳医学院分子生物学重点实验室	3	7	2.0	2.0