Npu DnaE内含肽构建及其对293T细胞高效反式剪接活性分析

• 作者: 崔文静 张矫 王欣 王雯雯 马祥敏
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: Npu DnaE 内含肽 蛋白质反式剪接
• 年，卷（期）: 2013,（44）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-13,后插1
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 字数: 3286字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2013.44.004

摘要

目的 构建Npu DnaE内含肽,探讨Npu DnaE内含肽是否在293T细胞中具备高效反式剪接活性.方法 制备融合基因Vn-NDn-myc和NDc-Vc,插入pCDH-CMV-MCS-EFl-Puro载体,构建质粒.转染293T细胞,荧光显微镜下观察目的蛋白Venus是否形成.48 h后收集细胞蛋白,应用Western blot技术进一步印证.结果 构建的质粒经限制性内切酶鉴定及测序比对正确,转染293T后可见共转染细胞组出现明亮荧光,弥漫分布于细胞质中,Western blot证明高量目的蛋白Venus形成.结论 成功构建Npu DnaE内含肽,其能在293T细胞中发挥反式剪接的生物学功能,并具有高效的剪接效率及功能目的蛋白形成率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔文静		3	5	1.0	2.0
2	张矫		3	5	1.0	2.0
3	马祥敏		3	5	1.0	2.0
4	王雯雯		3	5	1.0	2.0