流式细胞术检测大鼠Th1/Th2细胞的刺激方案研究

• 作者: 吴玮 张妤 王懿娜
• 来源期刊: 现代医药卫生
• 关键词: T淋巴细胞,辅助诱导 流式细胞术 细胞,培养的 佛波醇酯类 离子霉素 细胞因子类 抗原,CD3 抗原,CD8 抗原,CD4 大鼠
• 年，卷（期）: 2013,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3535-3537
• 页数: 3页
• 字数: 3516字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5519.2013.23.007

摘要

目的 探讨流式细胞术检测大鼠Th1/Th2细胞时使用刺激剂的最佳方案.方法用不同浓度佛波酯(PMA)联合不同浓度离子霉素(Ion)作为激活剂,刺激大鼠外周血T淋巴细胞,采用流式细胞仪三色法方案,观察和分析在不同浓度组合的激活剂刺激下检测T淋巴细胞内干扰素-γ(INF-γ)、白介素-4(IL-4)的分泌效果.结果PMA浓度为25 ng/mL时,联合浓度分别为0、2、5、10、15、20 μg/mL的Ion刺激大鼠淋巴细胞,胞内IFN-γ/IL-4的表达阳性率分别为(1.19±0.26)%/(2.46±0.32)%、(1.23±0.21)%/(2.56±0.86)%、(3.08±0.56)%/(12.01±2.01)%、(4.01±0.48)%/(9.80±1.80)%、(3.98±1.78)%/(11.85±4.83)%、(3.76±1.08)%/(10.78±2.35)%.结论选用工作浓度为5～10 μg/mL的Ion联合工作浓度为25 ng/mL的PMA刺激培养大鼠淋巴细胞即可起到较好的激活作用,而且不会带来如CD4细胞下调、流式细胞术设门难度增加等干扰因素.在该浓度下,CD3/CD8和CD4两种设门方案均可用于大鼠Th1/Th2细胞检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王懿娜	浙江大学医学院附属第一医院皮肤科	27	137	8.0	10.0
2	张妤	浙江大学医学院附属第一医院皮肤科	7	19	3.0	3.0
3	吴玮	浙江大学医学院附属第一医院皮肤科	11	59	4.0	7.0