人乳腺癌特异性基因1 mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测试剂盒的建立及应用

• 作者: 卞庚 徐婷娟 徐维平 沈国栋 沈干 程民 胡世莲
• 来源期刊: 中国临床保健杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 试剂盒,诊断 RNA,信使 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 63-67
• 页数: 5页
• 分类号: R446
• 字数: 5056字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.issn.1672-6790.2014.01.023

摘要

目的建立人乳腺癌特异性基因1（BCSG1）mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RTPCR）检测试剂盒，并评价其在乳腺癌循环肿瘤细胞检测中的应用价值。方法优化试剂盒中各组分的浓度、确定试剂盒的稳定性、灵敏度及特异性，并检测外周血样品中BCSG1mRNA的表达水平。结果优化了试剂盒中的引物、探针，成功制备了定值标准品，通过设立阴、阳性质控品的方法，解决了试剂盒的特异性、灵敏性、准确性及质量控制等关键技术问题，特异度及准确性均为95％以上，灵敏度为100拷贝/ml（全血）。外周血标本中BCSG1mRNA的检测结果为，12例临床确诊已转移的乳腺癌患者均为阳性，21例临床未确诊转移的乳腺癌患者中12例为阳性，其余9例为阴性，15例乳腺良性疾病患者、10例正常人均为阴性。结论建立的BCSG1mRNA实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒具有很高的临床应用价值，可用于检测外周血样品中BCSG1mRNA的表达量，检测结果可作为乳腺癌患者诊疗过程中的重要监测指标。