抗HCMV Pp65蛋白单克隆抗体的制备及性质研究

• 作者: 刘如石 刘胜姿 廖旻晶 李桑 李烨 许凤 邱义兰 邱果
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 Pp65蛋白 杂交瘤细胞 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 338-345
• 页数: 8页
• 分类号: R392
• 字数: 7205字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2014.04.009

摘要

人类巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)是一种机会性感染疱疹病毒,在人群中感染比较常见,但在免疫缺陷个体与新生儿中可引起严重的疾病.HCMV Pp65是HCMV活动感染的主要标志,也是临床检验检测HCMV感染的重要靶标.为研发抗HCMV Pp65蛋白单克隆抗体作为临床免疫检测HCMV感染的关键原料,本研究采用重组表达的HCMV Pp65蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠淋巴结细胞与sp2/0细胞融合,采用间接ELISA法筛选阳性克隆与效价测定,再用Western blotting进行抗体特异性鉴定,最后用免疫捕获PCR和免疫荧光法评价其应用前景.最终获得了1株能稳定分泌高效价的抗HCMV Pp65单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为8D6.Western blotting及间接ELISA检测其效价分别达1∶4 000和1∶105;细胞免疫荧光与免疫捕获PCR实验结果说明,该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有良好的亲和力和特异性,具有作为外周血细胞免疫荧光细胞化学和免疫捕获PCR检测HCMV临床感染的关键原料,也可作为双抗体夹心法检测HCMV临床感染的关键原料,为建立HCMV感染快速灵敏的临床诊断试剂打下了重要的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱义兰	湖南师范大学生命科学学院	23	124	7.0	10.0
2	刘如石	湖南师范大学医学院	34	210	8.0	13.0
3	李烨	湖南师范大学生命科学学院	12	59	4.0	7.0
4	刘胜姿	湖南师范大学医学院	21	108	6.0	10.0
5	廖旻晶	湖南师范大学医学院	9	12	2.0	3.0
6	邱果	湖南师范大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
10	许凤	湖南师范大学生命科学学院	4	16	2.0	4.0
11	李桑	湖南师范大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0