鸡胚血液原始生殖细胞的分离纯化及鉴定

• 作者: 于福先 朱志伟 滕菲 潘建治 石铭 陈晓宇 黄菁
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 原始生殖细胞 分离纯化 密度梯度离心 性腺嵌合体
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 910-915
• 页数: 6页
• 字数: 3985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.07.015

摘要

家禽的原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)是形成精子和卵子的前体细胞,可在性成熟的家禽体内生成精子和卵子,因此家禽PGCs可应用于以PGCs为基础的现代保种技术、转基因技术以及家禽的发育生物学等研究领域,具有重要的科研与应用价值.本研究使用Nycodenz密度梯度离心法在孵化至13～15期的鸡(Gallus gallus)胚血液中分离纯化鸡胚的PGCs,经显微注射针分拣后,PGCs的纯度可达99％以上,细胞直径主要集中于13～15 μm;将所分离纯化的PGCs分别通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色、高碘酸希夫氏(periodic acid-schiff,PAS)染色及阶段特异性胚胎表面抗原-1 (stagespecific embryonic antigens-1,SSEA-1)免疫化学染色进行鉴定,染色结果均出现PGCs所特有的反应;使用活细胞荧光染料PKH26对分离纯化的PGCs进行标记,成功标记的PGCs在荧光显微镜下可观测到红色荧光,将约200个标记后的PGCs,通过腹主动脉注入孵化至14～16期的受体鸡胚中,在孵化至第8天的鸡胚性腺冷冻切片中,可检测到供体PGCs的存在,这一结果表明,所分离纯化的PGCs可定植于受体鸡胚的性腺中.本研究为以PGCs为基础的种质资源保存研究以及转基因技术研究提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈晓宇	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	12	24	3.0	3.0
2	朱志伟	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	26	120	5.0	10.0
3	于福先	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	10	18	3.0	3.0
4	潘建治	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	14	21	3.0	3.0
5	黄菁	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	8	12	2.0	2.0
6	石铭	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	2	6	2.0	2.0
7	滕菲	浙江省农业科学院畜牧兽医研究所	1	4	1.0	1.0