应用小牛皮制备软骨修复载体的脱毛-脱细胞-结构改建工艺探讨

• 作者: 孙磊 杰永生 江建 綦惠 陈磊 高新生
• 来源期刊: 中国矫形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脱毛 脱细胞 结构改建 孔隙率
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 151-157
• 分类号: R318
• 语种: 中文
• DOI: 10.3977/j.issn.1005-8478.2014.02.11

摘要

[目的]软骨修复载体的制备是软骨组织工程的重要课题.本实验以小牛皮为原料,通过脱毛-脱细胞-结构改建的早期工艺探讨,掌握最佳制备流程,为后续工艺做准备.[方法]将小牛皮分别浸入0.5％ dispase溶液和0.25％胰蛋白酶溶液,4℃脱毛72 h,比较脱毛效果.乙酸溶胀,刮除/切除表皮和皮下组织,获得真皮组织.真皮组织分别浸入0.5％ SDS、1％ SDS与0.5％ TritonX-100进行脱细胞,充分冲洗之后冻干,HE染色比较脱细胞效果,MTT法进行细胞毒性检测.应用0.25％胰蛋白酶浸泡、0.25％胰蛋白酶浸泡联合220 V-250 W-40％功率超声振荡、0.5％胰蛋白酶浸泡、0.5％胰蛋白酶浸泡联合220 V-250 W-40％功率超声振荡四种方法进行结构改建,扫描电镜观察、MASSON染色、孔隙率检测比较结构改建效果.[结果]0.5％ dispase溶液和0.25％胰蛋白酶溶液均能够良好的去除小牛皮的毛发.0.5％SDS、1％ SDS脱细胞效果基本一致,TritonX-100似有将胶原纤维破坏的征兆,由于低浓度SDS更易于冲洗,后续实验采用0.5％ SDS脱细胞.细胞毒性检测为0级.0.5％胰蛋白酶浸泡联合220 V-250 W-40％功率超声是最佳的结构改建方法,改建后的载体胶原纤维光滑、立体感明显增强,孔隙率显著高于未改建的载体(P＜0.05).[结论]0.25％胰蛋白酶溶液脱毛-0.5％ SDS脱细胞-0.5％胰蛋白酶浸泡联合220 V-250 W-40％功率超声进行结构改建,是应用小牛皮制备软骨修复载体的最佳工艺.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙磊	北京积水潭医院北京市创伤骨科研究所	20	133	7.0	11.0
2	綦惠	北京积水潭医院北京市创伤骨科研究所	9	25	3.0	5.0
3	陈磊	北京积水潭医院北京市创伤骨科研究所	9	42	4.0	6.0
4	高新生	北京积水潭医院北京市创伤骨科研究所	8	32	3.0	5.0
5	杰永生	北京积水潭医院北京市创伤骨科研究所	6	19	3.0	4.0
6	江建	北京积水潭医院北京市创伤骨科研究所	2	3	1.0	1.0