米曲霉乳糖酶在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 侯重文 刘飞 朱希强 王凤山 钊倩倩
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 米曲霉 乳糖酶 毕赤酵母 pGAPZα载体 基因工程 克隆和表达 胞外分泌
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: Q556+.5|Q786
• 语种: 中文

摘要

成功将米曲霉(Aspergillus oryzae)乳糖酶基因(lac gene)克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体中,实现该乳糖酶的有效分泌和高效表达.以米曲霉cDNA文库为模板,通过PCR扩增得到米曲霉乳糖酶基因.将含有该米曲霉乳糖酶基因的表达载体pGAPZαA-lac以电转化方式转入到毕赤酵母表达系统,获得高效表达米曲霉乳糖酶的重组菌株GalC131.该工程菌株在YPD培养基中发酵72 h,发酵液中目的蛋白含量高,乳糖水解酶活达到530 U/mL,并且此工程菌株分泌表达的目的蛋白易于纯化,有利于工业化应用.