鸡β-防御素Gal-9 cDNA的克隆、表达及其抑菌活性的研究

• 作者: 冯培祥 尹燕博 张毅 朱梅胜 杨莉 檀学进 潘福星 郭妍妍 齐娟
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 β-防御素 Gal-9 重组蛋白表达 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 997-1003
• 页数: 7页
• 分类号: S852.42
• 字数: 4554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.06.019

摘要

旨在克隆鸡β防御素Gal-9基因,对其预测的成熟肽基因进行原核表达,并对产物进行抑菌活性的检测.根据GenBank发表的鸡β防御素基因Gal-9(NM 001001611.2)设计引物,采用RT PCR方法从鸡食道中扩增得到鸡β防御素Gal-9基因,将该成熟肽基因克隆到原核表达载体pET32a(+)的EcoR Ⅰ/XhoⅠ双酶切位点上,构建重组原核表达质粒pET 32a Gal 9.将重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3),于37℃进行诱导表达.结果扩增出Gal-9,其cDNA为204 bp,成熟肽编码42个氨基酸.SDS PAGE电泳表明,重组鸡Gal-9蛋白大小约为25 ku,与预期大小一致,重组蛋白主要以包涵体形式存在.重组鸡Gal-9蛋白对金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、粪肠球菌(ATCC 29212)、大肠杆菌(ATCC 25922)、酵母菌(GS115)都能产生抑菌作用,最小抑菌浓度分别为62.50、31.75、125.00、31.75 mg·L-1.成功获得了鸡β防御素Gal-9成熟肽基因的表达产物,证实了重组鸡Gal-9蛋白具有广谱的抗菌活性,体外抑菌试验为其在家禽生产中应用提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹燕博		69	359	11.0	15.0
2	檀学进		7	4	1.0	1.0
3	张毅		16	107	5.0	10.0
4	杨莉	青岛农业大学动物科技学院	7	21	2.0	4.0
5	郭妍妍		10	60	4.0	7.0
6	冯培祥	青岛农业大学动物科技学院	1	2	1.0	1.0
7	朱梅胜	青岛农业大学动物科技学院	1	2	1.0	1.0
8	潘福星	青岛农业大学动物科技学院	1	2	1.0	1.0
9	齐娟		1	2	1.0	1.0