沉默NF-κB基因对缺氧胃癌细胞增殖的影响及其机制

• 作者: 刘丹 张俊文
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 细胞增殖 NF-κB 缺氧诱导因子1,α亚基 磷脂酶D
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 33-38
• 页数: 6页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2014.01.006

摘要

目的:探讨通过RNA干扰技术沉默核因子-KB(nuclear factor-κB,NF-κB)基因对缺氧胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其可能的机制.方法:将沉默NF-κB基因的重组载体pcDNATM 6.2-GW/EmGFPmiR-NF-κB转染SGC-7901细胞,并筛选稳定转染的细胞株.实验分为对照组(SGC-7901细胞在常氧状态下培养)、缺氧组(SGC-7901细胞在缺氧状态下培养)、干扰组(稳定转染pcDNATM 6.2-GW/EmGFPmiR-NF-κB后的SGC-7901细胞在常氧状态下培养)和联合组(稳定转染pcDNATM 6.2-GW/EmGFPmiR-NF-κB后的SGC-7901细胞在缺氧状态下培养).应用锥虫蓝染色法检测各组SGC-7901细胞的存活率,平板克隆形成实验和细胞倍增时间法检测各组SGC-7901细胞的增殖变化,蛋白质印迹法检测各组SGC-7901细胞中NF-κB、缺氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和磷脂酶D-1(phospholipase D-1,PLD-1)蛋白的表达水平.结果:重组载体pcDNATM 6.2-GW/EmGFPmiR-NF-κB成功转染至SGC-7901细胞,并筛选获得稳定转染的细胞株.与对照组比较,缺氧组SGC-7901细胞的存活率变化不明显,干扰组和联合组SGC-7901细胞的存活率降低(P＜0.05);缺氧组SGC-7901细胞的克隆形成数增加,细胞倍增时间缩短(P＜0.05);干扰组和联合组SGC-7901细胞的克隆形成数减少,细胞倍增时间延长(P＜0.05);干扰组SGC-7901细胞中NF-κB、HIF-1α和PLD-1蛋白的表达水平明显下调,缺氧组SGC-7901细胞中NF-κB、HIF-1α和PLD-1蛋白的表达水平明显上调(P＜0.05).与缺氧组比较,联合组SGC-7901细胞中NF-κB、HIF-1α和PLD-1蛋白的表达水平明显下调(P＜0.05).结论:缺氧条件下,SGC-7901细胞中HIF-1α与NF-κB可能存在相互关系,沉默NF-κ基因可降低HIF-1α和PLD-1的表达,从而抑制缺氧条件下胃癌SGC-7901细胞的增殖能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张俊文		63	395	12.0	17.0
2	刘丹		95	331	11.0	15.0