猪伪狂犬病毒gD蛋白的截短表达与PPA-ELISA抗体检测方法的建立

• 作者: 吕素芳 沈志强 王金良 祖立闯 苗立中 董林 郭广君
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病毒 gD蛋白 截短表达 PPA-ELISA 检测
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 54-60
• 页数: 7页
• 分类号: S811.6
• 字数: 5576字
• 语种: 中文

摘要

为建立一种快速的猪伪狂犬病毒抗体检测方法,本研究参照已发表的PRV SA株基因组序列,PCR扩增了长约1 070 bp的gD基因片段,将目的片段定向克隆到pET30a原核表达载体,转化BL21表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组gD蛋白.重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证明具有良好的抗原性和特异性.以该蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白为二抗,建立了检测猪伪狂犬病毒抗体的PPA-ELISA检测方法.该方法与其他7种常见猪病病毒(CSFV、PPV、PRRSV、JEV、PCV-2、PEDV、TGEV)的阳性血清不发生交叉反应;批内重复性试验的变异系数小于5％,批间重复性试验的变异系数小于10％;与IDEXX gD-ELISA试剂盒相比较,符合率、敏感性和特异性分别为92.0％、95.1％和88.1％.本研究建立的PRV gD-PPA-ELISA抗体检测方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,为PRV的免疫猪群抗体监测、快速诊断和PRV流行病学调查提供一种快速、简便的血清学诊断方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王金良		154	750	13.0	19.0
2	沈志强		525	1950	18.0	25.0
4	苗立中		166	395	8.0	12.0
5	吕素芳		35	137	6.0	10.0
8	董林		24	76	6.0	7.0
9	祖立闯		62	322	9.0	14.0
10	郭广君		5	19	2.0	4.0