培养条件对重组青霉素G酰化酶表达及后翻译的影响

• 作者: 章文贤 蒋咏梅 贺望兴
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 青霉素G酰化酶 培养条件 表达 酶活 后翻译 聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 48-52
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 语种: 中文

摘要

青霉素G酰化酶(PGA)具有良好的催化酰化/去酰化特性,广泛应用于半合成及β-内酰胺抗生素工业中.由于嗜柠檬酸克鲁沃尔氏菌(Kc)产生的PGA具有良好的适于工业应用的特性,因此,对Kc来源的PGA在重组菌BL21(DE3)中的表达进行产酶条件优化.通过调整培养基装量、培养温度、起始pH值及诱导剂的浓度,结合对细胞生长量、蛋白表达量及酶活高低的检测,以期得到产生活性PGA的最优条件.发现起始pH值为7.0,装量30 mL,30℃培养,1.0 mmol/L IPTG诱导6h时,菌浓为16.83,总酶活达到27 905 U/L,单位酶活1 658 U/L/OD600的最佳结果.通过分析培养条件对PGA蛋白表达量(SDS聚丙烯凝胶电泳)和酶活的影响,发现PGA前体表达后的后翻译过程是产生活性酶的关键因素,该结果将为后期研究和工业应用提供重要参考依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋咏梅		20	116	6.0	10.0
2	章文贤		32	373	11.0	19.0
3	贺望兴		2	2	1.0	1.0