对羟基扁桃酸合酶基因的克隆表达及催化特性

• 作者: 丁重阳 刘双平 叶玉成 张梁 石贵阳
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 对羟基扁桃酸合酶 hmas 东方拟无枝酸 天蓝色链霉菌
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 工业微生物
• 页码范围: 8-16
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130120

摘要

[目的]比较两种不同来源基因重组的对羟基扁桃酸合酶(HmaS),考察其在大肠杆菌中的表达效率. [方法]分别对东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)和天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)来源的hmas进行异源表达,经离子交换层析和凝胶过滤色谱分离纯化获得HmaS,并检测HmaS的酶活和催化特性. [结果]来源于S.coelicolor的HmaSsc2比酶活是来源于A.orientalis的3.6倍;来源于A.orientalis的HmaSAo最适反应温度为28℃,在弱碱性条件下的酶活稳定性较好;来源于S.coelicolor的HmaSsc2最适反应温度为35℃,在28-45℃内保持较高的酶活,具有良好耐热性,在pH 7.0左右酶活最高,更易在偏中性的条件下发挥功能.[结论]HmaSsc2更适用于代谢工程改造大肠杆菌发酵法生产扁桃酸.