TGF-β3和BMP-7腺病毒共转染兔骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化的研究

• 作者: 侯洋 周许辉 唐先业 康健 杨立利 袁文 陈华江
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: TGF-β3 BMP-7 骨髓间充质干细胞 腺病毒 种子细胞
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 157-163
• 页数: 7页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 5254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2014.02.11

摘要

目的：探讨利用转基因技术构建的转化生长因子β3（transforming growth factor beta 3，TGF-β3）和骨形态发生蛋白7（bone morphogenetic protein 7，BMP-7）重组腺病毒转染兔骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchyme stem cells，BMSCs），诱导其向类髓核细胞分化的可行性。方法：将培养获得的BMSCs分成5组， A：空白对照组，B：免疫荧光对照组，C：TGF-β3单独转染组，D：BMP-7单独转染组，E：TGF-β3+BMP-7共转染组。利用转基因技术构建的TGF-β3和BMP-7重组腺病毒对BMSCs进行转染，荧光显微镜观察其转染效率，培养14d后，再以Western-Blot方法检测A、C、D、E组细胞TGF-β3和BMP-7蛋白分泌情况，以Realtime PCR方法检测各组蛋白聚糖（ACAN）、Ⅰ型胶原（Collagen Ⅰ）、Ⅱ型胶原（Collagen Ⅱ）、Ⅹ型胶原（Collagen Ⅹ）、SOX9基因表达水平，明确腺病毒转染后兔骨髓间充质干细胞的分化情况。结果：以TGF-β3和BMP-7重组腺病毒转染兔BMSCs后常规DMEM培养基培养14d，细胞形态出现明显变化，圆形及椭圆形细胞明显增多。Western blot方法检测，共转染组TGF-β3和BMP-7蛋白表达水平明显增高。培养14d时，Realtime PCR检测ACAN、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅱ、SOX9基因的表达水平转染组（C、D、E 组）较对照组（A、B 组）明显升高（P<0.05），其中Collagen Ⅰ和SOX9表达单独转染组（C、D 组）与共转染组（E 组）比较差异无显著性（P>0.05）， Collagen Ⅱ表达共转染组较单独转染组明显增高（P<0.05）。 TGF-β3单独转染组和共转染组的Collagen Ⅹ基因表达较BMP-7单独转染组和对照组明显降低（P<0.05）。结论：转基因技术重组TGF-β3和BMP-7腺病毒可成功转染兔BMSCs，获得TGF-β3和BMP-7蛋白的表达。 TGF-β3和BMP-7腺病毒共转染兔BMSCs后，可有效诱导兔BMSCs向类髓核细胞方向分化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康健	上海长征医院骨科	5	35	3.0	5.0
2	袁文	上海长征医院骨科	57	461	12.0	18.0
3	周许辉	上海长征医院骨科	23	97	6.0	9.0
4	杨立利	上海长征医院骨科	13	71	5.0	8.0
5	陈华江	上海长征医院骨科	17	68	5.0	7.0
6	侯洋	上海长征医院骨科	4	35	3.0	4.0
7	唐先业	上海长征医院骨科	1	12	1.0	1.0