斑鳜精液超低温冷冻保存及其效果分析

• 作者: 卢薛 周磊 曾雷 李桂峰 王鹏飞 罗渡 胥鹏
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 斑鳜 精子 冷冻保存 杂交育种 种质资源
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 250-259
• 页数: 10页
• 分类号: S967.3
• 字数: 7255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2014.00250

摘要

实验所用翘嘴鳜(♀, Siniperca chuatsi)2~3龄,体质量1000~1500 g；斑鳜(♂, Siniperca scherzeri Stein-dachner)1~2龄,体质量300~500 g。于繁殖季节选取成熟度好的亲鱼以促黄体素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和马来酸地欧酮(DOM)进行催产。通过筛选D-15、D-17、Ringer液和 M-Hank’s液4种稀释液和二甲基亚砜(DMSO)、甘油(Gly)、乙二醇(EG)、1,2-丙二醇(PG)和二甲基甲酰胺(DMF)5种抗冻剂,发现DMSO和D-17分别是优选的抗冻剂和稀释液。以D-17作为斑鳜精子的稀释液,按照1︰3(精液︰稀释液)体积比稀释,添加10%体积的DMSO作为抗冻剂,按照三步冷冻法超低温冷冻保存,37℃水浴解冻的斑鳜精子,经CASA分析精子活率为(83.26±18.20)%, SCGE检测表明70%以上的精子核DNA不会发生损伤； FCM分析表明26.74%的解冻精子有完整的细胞膜且线粒体功能正常；用冷冻复苏斑鳜精子与翘嘴鳜精卵进行人工授精,最高受精率(39.6±6.5)%,温度24~28℃孵化时间38 h,孵化后的鱼苗发育正常,开口1周以后的鱼苗全长(1.346±0.255) cm,体高(0.438±0.103) cm,体质量(0.045±0.020) g。鲜精受精鱼苗和冻精受精鱼苗在开口后1周的生长没有显著差异。因此认为D-17+10% DMSO可用于斑鳜精液的超低温冷冻保存。本研究将有助于斑鳜种质资源的收集保存和冷冻保存的斑鳜精液在翘嘴鳜(♀)×斑鳜(♂)杂交中的应用。