甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用

• 作者: 兰洋 刘涛 吴传芳
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 表观遗传学 甲基化CpG结合蛋白 Pull-down
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 408-412
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 字数: 3170字
• 语种: 中文
• DOI: 103969/j.issn.0490-6756.2014.02.034

摘要

本文构建了甲基化 CpG 结合结构域(MBD)蛋白的原核表达质粒,并表达了 GST-MBD融合蛋白,采用GST柱对该融合蛋白进行纯化。体外 pull-down 实验发现,GST-MBD融合蛋白能够与小鼠胚胎成纤维细胞MEF中 oct4基因的启动子 DNA 结合,验证了该蛋白的体外生物活性。利用相同的实验方法,发现 GST-MBD融合蛋白能够与 MEF 细胞中inhbb基因的启动子区结合,而不能与小鼠胚胎干细胞 R1中的inhbb基因的启动子区 DNA 结合,同时采用半定量PCR方法检测到inhbb基因在R1细胞中高表达,而在MEF细胞中不表达,表明inhbb基因受到DNA甲基化的调控。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘涛	四川大学生命科学学院	82	496	12.0	19.0
2	吴传芳	四川大学生命科学学院	40	140	6.0	11.0
3	兰洋	四川大学生命科学学院	14	52	4.0	7.0