单甲氧基聚乙二醇-醛对草酸脱羧酶的修饰

• 作者: 林日辉 田卫满 禤金彩 韦成昱 黄文勤 龙寒
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 草酸脱羧酶 单甲氧基聚乙二醇 活化 化学修饰
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 30-35
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

草酸脱羧酶(Oxdc)可用于预防、治疗草酸钙结石症,为了改善其使用性能,该文采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)对Oxdc进行修饰,并对修饰反应条件进行了初步优化,在mPEG-醛/Oxdc摩尔比50∶1,pH 5.0,37℃反应12h条件下,Oxdc修饰率为50.69％,酶活保持率67.52％.经SDS-PAGE和红外光谱(IR)分析,证明mPEG共价结合于酶蛋白分子上.酶学特性分析发现,热处理后修饰草酸脱羧酶(mPEG-Oxdc)的酶活保持21.6％,而野生草酸脱羧酶(Oxdc)酶活完全丧失;在pH 2.0～pH6.0酸性环境下mPEG-Oxdc的酶活相对高于Oxdc;经胰蛋白酶处理,Oxdc相对酶活仅为20.6％,而mPEG-Oxdc保持47.1％.结果表明:mPEG-Oxdc相对于Oxdc,其热稳定性、pH适应性及对胰蛋白酶的耐受性都有所增强.