特异性抑制乏氧诱导因子-1α表达的siRNA筛选

• 作者: 张俊玲 汪步海 沈雁 王珏
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 乏氧诱导因子1α 人鼻咽癌CNE2 小分子干扰RNA 实时定量PCR 放疗抵抗
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 115-117
• 页数: 3页
• 分类号: Q81
• 语种: 中文

摘要

筛选有效抑制乏氧诱导因子-1α(HIF-1 α)表达的小干扰RNA (siRNA)序列,并观察其对细胞中HIF-1α表达的抑制作用.设计针对HIF-1 α的6对(siRNA1217,siRNA1612,siRNA2258,siRNA2752,siRNA3724,siRNA3168)及一条阴性对照siRNA(称为NC).在Lipofectamine 2 000介导下转染人鼻咽癌细胞系CNE2.同时采用RT-PCR法和Western blot方法检测细胞中HIF-1α含量,以β-actin蛋白做内参照.结果:Lipofectamin 2 000在2μL转染40 pmol/L时,能实现最大转染效果.与其他各组相比,转染了siRNA3724,siRNA3168基因序列的人鼻咽癌细胞中,编码HIF-1α mRNA的含量明显减少.成功设计了针对HIF-1α的siRNA,并从中筛选出HIF-1 αsiRNA1612,siRNA3724,siRNA3168能够有效抑制人鼻咽癌表达,为肿瘤的放射治疗及其临床应用奠定了基础.