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土壤宏基因组中抗草甘膦新基因的克隆与转化水稻的研究
土壤宏基因组中抗草甘膦新基因的克隆与转化水稻的研究
作者:
刘文国
王云鹏
马建
马景勇
马瑞
原文服务方:
作物学报
宏基因组
水稻
农杆菌
遗传转化
摘要:
EPSPS (5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶,EC 2.5.1.19)是植物芳香族氨基酸和植物次生代谢产物生物合成中莽草酸途径的关键酶;同时也是广谱性除草剂草甘膦的作用目标.本实验通过对草甘膦污染土壤宏基因组文库的建立及筛选,成功克隆了一个新的草甘膦抗性的EPSPS基因(命名为soilEPSPS).序列分析表明,soilEPSPS基因全长1404 bp,其编码的467个氨基酸中未涉及已公布专利中保护的氨基酸序列.原核功能验证表明,该基因对草甘膦的耐受能力优于EPSPS CP4基因.将该基因与水稻Rubisco SSU引导肽相融合构建由actin启动子驱动的植物表达载体,用农杆菌介导法实现了水稻的遗传转化.抗性再生植株的PCR和Southern杂交结果表明所获得的26株再生植株均为转基因阳性植株,其中共有3个单拷贝转化事件.草甘膦抗性鉴定证明纯合体T2代植株能够耐受高达500 mmol L-1的草甘膦.本研究为转基因抗除草剂水稻新品种的培育奠定了基础.
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研究方法
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文献信息
篇名
土壤宏基因组中抗草甘膦新基因的克隆与转化水稻的研究
来源期刊
作物学报
学科
关键词
宏基因组
水稻
农杆菌
遗传转化
年,卷(期)
2014,(7)
所属期刊栏目
作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
研究方向
页码范围
1190-1196
页数
7页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.3724/SP.J.1006.2014.01190
五维指标
作者信息
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姓名
单位
发文数
被引次数
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1
王云鹏
吉林农业大学农学院
7
19
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3
马瑞
30
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12.0
4
刘文国
吉林农业大学农学院
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5.0
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马景勇
吉林农业大学农学院
38
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12.0
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7
马建
吉林农业大学农学院
60
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13.0
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版权信息
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期刊影响力
作物学报
主办单位:
中国作物学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0496-3490
CN:
11-1809/S
开本:
大16开
出版地:
邮发代号:
创刊时间:
1950-01-01
语种:
chi
出版文献量(篇)
5614
总下载数(次)
0
总被引数(次)
197718
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