甲状腺激素受体α在猪有腔卵泡发育和孤雌激活胚胎发育过程中表达模式

• 作者: 刘帅 刘庆友 崔奎青 杨桂芳 石德顺 谢炳坤 钟俊洁
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 甲状腺激素受体α 卵泡发生 早期胚胎发育
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 901-909
• 页数: 9页
• 分类号: S823.3
• 字数: 5805字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.06.007

摘要

本研究旨在探讨猪不同发育时期的卵泡甲状腺激素受体α(TRα)蛋白的表达规律,以及体外培养猪卵母细胞和早期胚胎中TRα的表达模式.采用化学发光免疫分析法(CLIA)测定了不同直径大小猪卵泡甲状腺激素(THs)的含量,运用免疫组化法对猪卵巢TRα进行定位染色,应用免疫荧光技术和QRT PCR技术分别检测体外培养猪卵母细胞和孤雌激活早期胚胎TRα蛋白的表达定位和TRα mRNA水平表达变化规律.结果表明:猪卵泡中T3含量随着卵泡直径的增大呈现先下降后上升的趋势.免疫组化染色结果显示,阳性信号主要见于GC、TC及卵母细胞.随着卵泡的发育,TRα阳性细胞数量呈增长趋势,原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡之间阳性细胞数量差异显著.QRT PCR结果显示,猪TRα基因在不同成熟培养阶段的COCs均有表达,在孤雌激活早期胚胎1细胞、2细胞和4细胞胚胎期显著高于8细胞胚胎期、桑椹期和囊胚期(P＜0.05).免疫荧光观察到在猪体外成熟的COCs不同发育阶段颗粒细胞均表达TRα蛋白,在24～36 h卵丘颗粒细胞表达阳性最强.TRα蛋白在猪孤雌激活早期胚胎不同阶段中均有表达,且8细胞、桑椹胚和囊胚的阳性信号较强.结果提示,不同直径猪卵泡液中均存在THs,不同成熟阶段COCs和早期胚胎中TRα均呈现表达,推测THs可能通过与TRα结合而参与调控猪卵泡发生和早期胚胎发育.