目的:探讨人树突状细胞(DC)与人肺癌细胞 A-549融合所得疫苗在制备过程中的生物学特性,总结高效制备融合疫苗的方法。方法应用 GM-CSF 和 IL-4优化的方法制备肺癌患者人外周血单核细胞以获得 DC,寻找 DC 制备率最高时间段;同时应用 PKH672GL(绿色荧光)和 PKH262GL(红荧光)分别标记 DC 和肺癌细胞 A-549细胞,筛查最佳的融合比例。结果应用 GM-CSF 和 IL-4优化法进行 DC 制备第7天所得百分率为(66.26±5.13)%,高于其他时间( P <0.05);通过对比不同融合比例 DC 与人肺癌细胞 A-549,显示1∶1时所取得的融合百分率为(35.15±2.16)%,高于其他比例( P <0.05)。结论在 DC 制备过程中制备第7天所得 DC 百分率最高,应选取此时作为提取 DC 的最佳时间;同时 DC 与人肺癌细胞 A-549以1∶1比例相融合所得疫苗百分率最高。