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摘要:
果胶酯酶(pectin methylesterase,PME)催化细胞壁中多聚半乳糖醛酸的脱甲酯化,可以降解植物细胞壁中的果胶多糖而与果实软化有关.本研究根据白梨果胶酯酶基因PcPME4的序列,设计一对含有特定酶切位点的特异性引物,以鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.)cDNA为模板通过PCR扩增得到一段294bp的PME基因片段.将片段反向插入植物表达载体pBI121的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,经限制性酶切分析和测序分析证明成功构建PME基因的反义表达载体pBI121-AsPME.将pBI121-AsPME电转化农杆菌EHA105,利用含pBI121-AsPME的农杆菌工程菌液侵染鸭梨外植体后于抗性培养基中诱导愈伤组织,获得的抗性愈伤组织经PCR初步检测含有反向PME基因片段,荧光定量PCR检测结果显示受侵染的愈伤组织中PME基因表达量降低,表明反向插入的PME基因片段起到了抑制内源基因表达的效果.
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文献信息
篇名 鸭梨果胶甲酯酶基因反义表达载体的构建及转化
来源期刊 核农学报 学科
关键词 鸭梨 果胶酯酶 反义表达载体 转化
年,卷(期) 2014,(4) 所属期刊栏目 植物诱变育种·农业生物技术
研究方向 页码范围 597-604
页数 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.11869/j.issn.100-8551.2014.04.0597
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 齐靖 河北经贸大学生物科学与工程学院 7 15 3.0 3.0
2 李会宣 河北经贸大学生物科学与工程学院 15 73 5.0 8.0
3 李桂琴 河北经贸大学生物科学与工程学院 39 209 8.0 13.0
4 闫洪波 河北经贸大学生物科学与工程学院 22 51 4.0 5.0
5 许冬倩 河北经贸大学生物科学与工程学院 12 60 4.0 7.0
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鸭梨
果胶酯酶
反义表达载体
转化
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研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
核农学报
月刊
1000-8551
11-2265/S
16开
北京市海淀区圆明园西路2号农产品加工研究所
1987
chi
出版文献量(篇)
4988
总下载数(次)
6
相关基金
河北省自然科学基金
英文译名:
官方网址:
项目类型:
学科类型:
论文1v1指导