非经典型自噬替代经典型自噬影响单核-巨噬细胞分化的研究

• 作者: 蔡金洋
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 生物学
• 关键词: 单核-巨噬细胞 经典型自噬 非经典型自噬 细胞分化
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 241-246,253
• 页数: 7页
• 分类号: Q254
• 字数: 5019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2014.04.001

摘要

目的：研究经典型自噬缺失时，非经典型自噬是否在小鼠单核-巨噬细胞分化中起作用。方法：将Atg7小鼠与Lyz-Cre小鼠杂交获得单核巨噬细胞自噬特异性敲除的小鼠模型Atg7f/f；Lyz-Cre小鼠，使用C57BL/6小鼠作为对照组。应用磁珠分选的方法富集单核细胞并加因子诱导分化，流式细胞术检测单核-巨噬分化比例(Ly6C-F4/80)及细胞凋亡比例；实时荧光定量PCR方法检测非经典型自噬关键基因Vps34，Beclin1和ULK1 mRNA表达水平；Western Blot方法检测Vps34，beclin1，ULK1以及非经典型自噬关键蛋白Rab9的蛋白表达水平；使用非经典型自噬抑制剂Brefeldin A(BFA)处理单核细胞，流式细胞术检测单核-巨噬分化比例；使用共聚焦显微镜及电镜观察自噬情况。结果：与野生型小鼠相比，Atg7f/f；Lyz-Cre小鼠单核-巨噬细胞分化能力明显降低，凋亡比率显著上升(P均<0.05)。共聚焦及电镜结果显示Atg7f/f；Lyz-Cre小鼠经典型自噬被破坏，但仍存在自噬响应。而非经典型自噬关键因子Vps34，Beclin1，ULK1及Rab9蛋白表达水平均上调(P均<0.05)。非经典型自噬抑制剂BFA能抑制Atg7f/f；Lyz-Cre小鼠单核-巨噬分化但不影响野生型小鼠。结论：经典型自噬对小鼠单核-巨噬细胞分化起重要作用，而当其被破坏时，非经典型自噬活性上调以维持单核-巨噬细胞分化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡金洋	苏州大学唐仲英血液学研究中心	1	0	0.0	0.0