猪精原干细胞超微结构观察与体外冻存条件的优化研究

• 作者: 卫恒习 师如意 张守全 张秀娟 李莉 白银山
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪精原干细胞 超微结构 冻存
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学? 兽医学
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q954.43
• 字数: 4494字
• 语种: 中文

摘要

[目的]检测猪精原干细胞（ PSSCs ）在分化过程中其内部超微结构及细胞器的变化情况，并且找到适宜PSSCs的冷冻保存条件，为长期保存PSSCs和研究PSSCs的分化机制提供科学依据。[方法]采用两步酶消化法和Percoll不连续密度梯度法获取PSSCs，利用透射电子显微镜（ TEM）对PSSCs在体外不同培养时间的超微结构变化进行观测，并且利用台盼蓝染色法和碱性磷酸酶（ AP）染色法比较不同浓度的甘油和二甲基亚砜（ DMSO）保存液对PSSCs冻存效果的影响。[结果和结论]未分化的PSSCs细胞膜完整平滑，细胞器正常，胞质均匀，无伪足出现，细胞核清晰。而开始分化的 PSSCs 出现伪足，线粒体数量大幅增加。冻存7 d 后，解冻结果表明， PSSCs 以V（DMSO）∶V（DMEM/F12）∶V（FBS）∶V（100×双抗）＝10∶69∶20∶1为宜。