细胞分裂周期蛋白2启动子报告基因载体的构建与鉴定

• 作者: 吴炜 周辉 赵明
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 细胞周期蛋白类 基因,cdc 细胞周期蛋白质依赖激酶类 转录启动子 细胞周期 萤光素酶类
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 101-104
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2014.02.002

摘要

目的：构建细胞分裂周期蛋白2（Cdc2）基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Cdc2-promoter，并检测其转录活性。方法根据UCSC软件查找的人基因组DNA的Cdc2启动子序列并设计两端引物，扩增人基因组DNA中的Cdc2启动子。用限制性内切酶SacⅠ和XhoⅠ双酶切质粒pGL3-Basic和Cdc2启动子后，将Cdc2基因启动子插入到pGL3-Basic报告基因载体上。重组质粒命名为pGL3-Cdc2-promoter。将其与内参质粒pRL-SV40瞬时共转染骨肉瘤细胞U2OS，检测双荧光素酶活性。结果成功构建Cdc2基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Cdc2-promoter，质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时共转染pGL3-Cdc2-promoter/pRL-SV40组荧光素酶活性为1.5915±0.1998，高于转染pGL3-Basic/pRL-SV40组的荧光素酶活性值0.0499±0.0104。结论 pGL3-Cdc2-promot-er在骨髓瘤细胞U2OS细胞中能被转录激活，为进一步将其用于抗肿瘤药物的筛选与评价奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵明	南方医科大学病理生理学教研室	65	205	7.0	9.0
2	吴炜	南方医科大学病理生理学教研室	3	2	1.0	1.0
3	周辉	南方医科大学病理生理学教研室	2	2	1.0	1.0