上调miR-181b表达对乳腺癌细胞功能的影响

• 作者: 房林 李晓宇 李登峰 罗颀枫 魏传奎
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 微RNAs 细胞增殖 细胞周期蛋白依赖性激酶8 miR-181b 细胞,MDA-MB-231,MCF-7
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 197-203
• 页数: 7页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2014.03.001

摘要

目的:探讨上调miR-181b的表达对人乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞功能的影响及其可能的靶向基因.方法:应用脂质体介导的方法将miR-181b模拟物(miR-181b mimics)分别转染MDA-MB-231和MCF-7细胞后,通过MTT、Transwell和FCM法分别检测细胞增殖和迁移能力及细胞周期的变化.将含细胞周期蛋白依赖性激酶8 (cyclin-dependent kinase 8,CDK8)基因3'端非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR)的重组载体psiCHECK-2/CDK8-3' UTR和miR-181bmimics共转染入人胚肾HEK293T细胞,应用双荧光素酶报告系统验证CDK8基因3'-UTR是否有miR-181b的结合位点.蛋白质印迹法检测miR-181b mimics转染后MDA-MB-231和MCF-7细胞中CDK8蛋白的表达情况.结果:与转染miR-181b模拟物阴性对照(negative control,NC)(miR-181b mimics-NC)组比较,miR-181b mimics转染组MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖和迁移能力受到抑制(P＜0.05),细胞周期主要阻滞于G0/G1期(P＜0.01);psiCHECK-2/CDK8-3'UTR和miR-181b mimics共转染组HEK293T细胞的荧光素酶活性下降(P＜0.01),证实miR-181b与CDK8基因3'-UTR可特异性靶向结合.与转染miR-181bmimics-NC组比较,miR-181b mimics转染组MDA-MB-231和MCF-7细胞中CDK8蛋白的表达水平明显下调(P＜0.05).结论:上调miR-181b的表达可显著抑制人乳腺癌细胞的增殖和迁移,这种作用可能与miR-181b靶向调节CDK8的表达有关.