禾谷镰孢菌果胶裂解酶PelA的生物学功能分析

• 作者: 姚昇华 张晓伟 张栋 许玲 贾雷杰
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 果胶裂解酶 禾谷镰孢菌 小麦胚芽鞘
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 243-252
• 页数: 10页
• 语种: 中文

摘要

果胶裂解酶是果胶酶的重要成员之一,能够通过β-消除作用,催化降解(1→4)-α-D-聚半乳糖醛酸.本研究首次鉴定出禾谷镰孢菌中的一个果胶裂解酶PelA,并在体外检测了其生化特性.PelA基因(FGSG_02386)的cDNA被克隆并进行了原核表达,同时构建了单基因敲除突变体.将重组质粒pET-28a(+)-PelA转化蛋白表达菌株大肠杆菌BL21表达目的蛋白,纯化后的蛋白具有果胶裂解酶活性.酶活性测定结果显示,该酶的活性受到外界环境因素如温度、钙离子浓度和pH条件的影响,其最适反应条件为50℃,CaC12浓度0.5 mmol·L-1,pH 8.5.在侵染小麦胚芽鞘时PelA单基因突变体的毒力较野生型菌株并没有出现明显变化.