遗传眼病永生化细胞系建立方法

• 作者: 李宁东 王冬杰 韩瑞芳
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 遗传眼病 EB病毒 永生化B淋巴细胞系 成纤维细胞 原代培养
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1114-1117
• 页数: 4页
• 字数: 4676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2014.0309

摘要

目的 通过遗传眼病患者的外周血或皮肤组织建立永生化细胞系,以保存其遗传资源.方法 永生化B淋巴细胞系的建立:抽取患者静脉血,分离淋巴细胞,以EB病毒体外转化B淋巴细胞为类淋巴母细胞,利用环孢霉素A抑制T淋巴细胞RNA聚合酶Ⅱ活性,防止已转化B淋巴细胞因受到T淋巴细胞的攻击而退化,培养后建立永生化B淋巴细胞系;皮肤成纤维细胞原代培养:利用DispaseⅡ酶处理离体皮肤组织以分离表皮组织,将其余组织剪碎后贴瓶培养,成纤维细胞可从组织块爬出,生长成为细胞系.结果 永生化B淋巴细胞系:共完成标本17例,成功建系15例,成功率88.2％;经过转化后B淋巴细胞悬浮生长,胞浆丰富、形态各异,聚集成团,可无限传代用于实验研究.皮肤成纤维细胞原代培养:共完成标本5例,成功建系3例,成功率60.0％;皮肤成纤维细胞贴壁生长,呈典型纺锤形,中间饱满,两边细长,50代以内增殖旺盛可用于实验研究.结论 通过遗传眼病患者的外周血和皮肤组织可建立永生化B淋巴细胞系和皮肤成纤维细胞系以保存其全部遗传信息,为进一步研究相关遗传性眼病奠定物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宁东		19	78	4.0	8.0
2	王冬杰	天津医科大学眼科临床学院	1	3	1.0	1.0
3	韩瑞芳		4	14	2.0	3.0