大肠杆菌L-色氨酸合成的代谢流分析

• 作者: 张成林 徐庆阳 申彤 谢希贤
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 工学
• 关键词: L-色氨酸 代谢流 大肠杆菌 转酮酶 磷酸烯醇式丙酮酸合成酶 贮碳因子
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 49-52
• 页数: 4页
• 分类号: TQ922|Q78
• 字数: 2554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.01.012

摘要

目的：从代谢流的层面研究育种过程中基因操作对色氨酸积累的影响，为色氨酸菌种选育的设计思路提供理论指导和验证。方法：根据实验菌株的代谢特点构建L-色氨酸代谢网络图，对出发菌株TRTH0709，及其重组菌株TRTH1013、TRTH1105和TRTH1107在30 L发酵罐中进行分批流加发酵试验，在发酵进入稳定期后的26~28 h，分别检测主要胞外代谢物的浓度并计算变化速率。结果和结论：得到了各菌株在拟稳态下的代谢流分布图。转酮酶基因（tktA）和磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因（ppsA）过表达能显著影响中心代谢途径，使代谢流向有利于色氨酸合成的方向改变，贮碳因子基因（csrA）敲除的影响较小，但在tktA和ppsA过表达质粒存在的情况下对色氨酸合成的代谢流有明显的促进作用。进一步的菌种改造仍有待进行，葡萄糖转运系统的替代和三羧酸循环的减弱是主要方向。