溶藻弧菌减毒活疫苗的构建及其免疫保护性

• 作者: 丁燏 吴灶和 周泽军 庞欢瑛 简纪常 蔡双虎 闫秀英
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 溶藻弧菌 vscO 减毒活疫苗 免疫保护
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 769-776
• 页数: 8页
• 分类号: S941
• 字数: 6071字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2014.00769

摘要

采用Overlap PCR和同源重组技术,结合氯霉素(Cm)正向筛选和sacB基因蔗糖负向筛选,构建了溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)Ⅲ型分泌系统(Type III secretion system, T3SS)注射装置蛋白vscO基因无标记框内缺失突变株ZJ03ΔvscO。在以石斑鱼(Epinephelus coioides)为模型的感染实验中发现ZJ03ΔvscO的毒力较ZJ03下降约150倍。将ZJ03ΔvscO作为减毒活疫苗通过注射、浸泡的途径免疫石斑鱼(Epinephelus coioides)后,发现其对溶藻弧菌有很好的保护效应,其中注射组的免疫保护率达84%,浸泡组次之(68%)。血清效价分析显示,免疫后第4周注射组和浸泡组的效价均达到最高值,分别为1：2048和1︰128。上述结果表明,所构建的ZJ03ΔvscO减毒活疫苗可有效提高石斑鱼对溶藻弧菌的免疫力,并且免疫和攻毒的途径可能是影响免疫保护效果的因子。本研究旨在为溶藻弧菌引起的鱼类疾病防治提供技术支撑。