miR-200b通过靶向CD133抑制胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞的生长

• 作者: 何汉江 杨亮 赵文健
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 微RNA 受体,细胞表面 细胞增殖 细胞迁移分析
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 231-237
• 页数: 7页
• 分类号: R739.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2014.03.006

摘要

目的:明确微RNA(microRNA,miRNA) miR-200b是否能通过靶向调控CD133的表达而抑制胶质瘤细胞生长和侵袭的能力,从而揭示miR-200b在抑制肿瘤生长中的分子机制.方法:首先构建CD133 mRNA3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'UTR)荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统观察miR-200b对CD133 mRNA 3'-UTR荧光素酶活性的影响;随后采用脂质体法将miR-200b模拟物(mimics)转入胶质瘤U251细胞中,同时以转入CD133-小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)为阳性对照;采用蛋白质印迹法检测CD133蛋白表达水平的改变;MTS法检测miR-200b mimics对U251细胞增殖活性的影响,Transwell小室法检测对细胞袭侵袭能力的影响;最后,通过干细胞成球实验检测miR-200b mimics对胶质瘤U251干细胞微球体形成的影响.结果:双荧光素酶报告检测结果显示,miR-200b能特异性地与CD133 mRNA 3'-UTR结合,抑制其荧光素酶的活性.过表达miR-200b的U251细胞中CD133蛋白表达水平明显降低,可显著抑制U251细胞的侵袭能力,而过表达CD133可拮抗miR-200b对U251细胞增殖和侵袭的影响;干细胞成球实验证实,miR-200b能抑制胶质瘤U251干细胞的微球体形成能力.结论:miR-200b通过靶向调控CD133的表达而抑制胶质瘤细胞增殖、侵袭及干细胞的形成.