一种快速提取血吸虫虫卵方法的建立

• 作者: 朱传刚 李浩 林矫矫 洪炀 童来保 许瑞 赵家喜 赵登云 陆珂
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 日本血吸虫 虫卵 氢氧化钠 抗原
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 58-65
• 页数: 8页
• 分类号: S852.735
• 字数: 5181字
• 语种: 中文

摘要

为探索一种快速提取血吸虫虫卵并保持虫卵抗原性的方法，本研究用血吸虫尾蚴感染兔并收集其肝脏，分别用不同浓度的NaOH、不同温度和时间消蚀含有虫卵的肝脏匀浆液，以确定最佳提取虫卵条件。通过方阵法确定所提取虫卵的可溶性抗原最佳包被浓度，并对虫卵抗原灵敏度进行了检测。另外，通过测定75份阳性血吸虫水牛血清和60份阴性水牛血清，进一步检测了此法提取并制备抗原的灵敏性。结果表明，本研究所建立的方法在不同NaOH浓度、作用温度和作用时间下，对提取的虫卵均产生影响。NaOH浓度越高，作用时间越久，消蚀温度越高，对虫卵的破坏越显著，表现在虫卵内容物的凝聚和消融，虫卵的空壳化增多。3种不同浓度NaOH 提取虫卵的抗原检测下限分别为1/800、1/1600、1/3200，较过筛法的抗原检测下限1/400有显著提高。对水牛的血清检测结果表明，用NaOH消蚀法提取的虫卵抗原检测血吸虫灵敏性是93%，比常规过筛法高5%，特异性是100%，比常规过筛法高3%。本研究结果表明NaOH消蚀法可快速提取高洁净度的虫卵并保持虫卵的抗原性不被破坏，该法提取虫卵的最佳NaOH浓度是5%~10%，作用温度是45℃左右，作用时间是5~10 min。在最佳条件下制备的虫卵较常规过筛法的纯净度高，虫卵得率也是常规过筛法的3倍以上。