酵母双杂交筛选与CVB3 VP3相互作用的人心脏蛋白

• 作者: 夏燕华 张志勤 王静 赵颖洁 邹叶青 项国仕 黄孝天
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 酵母双杂交 CVB3 VP3 蛋白相互作用
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: ?实验研究?
• 页码范围: 1014-1019
• 页数: 6页
• 分类号: R373
• 字数: 4236字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.10.006

摘要

目的：从人心脏cDNA文库中筛选与B3型柯萨奇病毒（coxsackievirus group B type 3，CVB3）结构蛋白VP3相互作用的蛋白，为进一步研究CVB3分子致病机制提供新的线索。方法构建酵母双杂交重组质粒（pGBKT7-VP3），转化至感受态酵母菌AH109，检测BD-cMyc-VP3融合蛋白自激活，应用酵母双杂交筛选与CVB3 VP3相互作用的人心脏蛋白。对阳性候选克隆进行测序和同源性比对分析；α-半乳糖苷酶活性定量分析 V P3与各阳性蛋白之间相互作用的强弱。结果诱饵质粒pGBKT7-VP3构建成功，检测到BD-cMyc-VP3融合蛋白在AH109中表达，且诱饵蛋白VP3在酵母中不存在自激活，从人心脏cDNA文库中筛选到10个与CVB3 VP3相互作用的蛋白：真核翻译起始因子4A2、羟酰辅酶A脱氢酶三官能蛋白转录变体3、肌钙蛋白I3型、平滑肌蛋白3、线粒体乙醛脱氢酶2等。结论本研究成功应用酵母双杂交技术筛选出与CVB3 VP3相互作用的10个蛋白。为研究CVB3引起心肌炎和心肌疾病的分子致病机制提供了一些新的线索。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹叶青		25	69	4.0	7.0
2	王静	南昌大学医学院微生物学教研室	88	309	10.0	14.0
3	黄孝天	南昌大学医学院微生物学教研室	32	107	7.0	8.0
4	夏燕华	南昌大学医学院微生物学教研室	9	20	3.0	4.0
5	张志勤	南昌大学医学院微生物学教研室	4	21	2.0	4.0
6	赵颖洁	南昌大学医学院微生物学教研室	2	3	1.0	1.0
7	项国仕	南昌大学医学院微生物学教研室	4	14	2.0	3.0