miR-20b过表达对P19细胞增殖和细胞分化的影响

• 作者: 余章斌 刘雪华 彭宇竹 朱春 朱莎莎 朱金改 李萌萌 胡晓山 韩树萍
• 来源期刊: 发育医学电子杂志
• 关键词: P19细胞 miR-20b 细胞增殖 心肌分化
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 87-92
• 页数: 6页
• 字数: 3812字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨miR-20b过表达对P19细胞增殖和细胞分化的影响.方法 将包含鼠miR-20b成熟序列的慢病毒载体及空载体分别感染P19细胞,通过嘌呤霉素筛选2周,建立稳定过表达鼠mR-20b的P19细胞系.用Real-time PCR的方法验证稳定细胞表达株.用CCK-8方法检测稳定感染miR-20b过表达慢病毒和空载体的P19细胞间细胞增殖的差别.将稳定感染的两组细胞以无血清培养液37℃孵育24小时使细胞停留于GO期,而后恢复血清培养,取不同时间点的细胞,使用流式细胞仪检测两组间细胞周期的差别,从而间接验证CCK-8的结果.以1％二甲基亚砜(DMSO)将两组稳定感染的P19细胞诱导分化为心肌细胞,Real-time PCR检测心肌分化相关标志基因的表达,并用光镜观察分化过程中的形态变化.结果 建立了稳定表达miR-20b的P19细胞系,与空载体组相比,miR-20b过表达可抑制P19细胞的增殖,促进心肌分化相关标志基因的表达(P ＜0.05,P＜0.01或P＜0.001).结论 miR-20b过表达可显著抑制P19细胞的增殖,并具有促进P19细胞向心肌细胞分化的作用.