海洋富油微拟球藻 Nannochloropsis gaditana CCAP849/5的转化及外源基因整合方式

• 作者: 余桂兰 孔任秋 李秀波 胡晗华
• 来源期刊: 热带海洋学报
• 关键词: 微拟球藻Nannochloropsis gaditana CCAP849/5 转化 外源基因 整合
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 海洋生物学
• 页码范围: 72-77
• 页数: 6页
• 分类号: P735
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5470.2014.02.010

摘要

微拟球藻 Nannochloropsis 被认为是具有作为生物柴油原料开发潜力的微藻。为了能够实现工业化生产，有效地利用基因工程或遗传操作手段改造微藻，提高产量，建立稳定有效的遗传转移方法十分必要。本研究以微拟球藻本源β-tublin基因启动子和三角褐指藻Phaeodactylum tricornutm fcpA终止子驱动和终止来源于细菌的sh ble抗性选择基因，构建了一个转化载体 pHB4857。将 pHB4857以电转移的方法转化海洋富油微拟球藻 Nannochloropsis gaditana CCAP849/5。结果显示，转化子可以在3μg·mL-1 zeocin的抗性培养基中生长， PCR检测sh ble基因为100%插入率，转化效率为1.25×10-6。DNA印迹杂交结果表明，外源基因是以随机整合的方式一个或多个拷贝插入到宿主核基因组中的，大多数转化子中的外源基因的整合是完整的。转化子在抗性培养基中每10天传一代，连续传代7个月以上，未检测到抗性基因丢失现象，外源抗性基因可以在宿主细胞中稳定存在。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡晗华	中国科学院水生生物研究所淡水生态国家重点实验室	25	489	13.0	22.0
2	余桂兰	中国科学院水生生物研究所淡水生态国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
6	李秀波	中国科学院水生生物研究所淡水生态国家重点实验室	8	61	3.0	7.0
7	孔任秋	中国科学院水生生物研究所淡水生态国家重点实验室	16	151	7.0	12.0