大鲵铁蛋白重链FTH基因的克隆、鉴定及表达分析

• 作者: 刘小林 李锋刚 杨辉 王立新 胡伟 蓝青景
• 来源期刊: 水生生物学报
• 关键词: 大鲵 铁蛋白重链 序列分析 原核表达 组织分布
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 页码范围: 27-34
• 页数: 8页
• 分类号: 786
• 字数: 6696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2014.04

摘要

从大鲵皮肤cDNA文库中,筛选出大鲵铁蛋白重链AdFTH的cDNA序列,其全长为864 bp,开放阅读框为531 bp,编码176个氨基酸,5′和3′非翻译编码区(Untranslated region, UTR)分别为120 bp和214 bp,预测蛋白质的分子量为20.6 kD,理论等电点PI为5.41,预测蛋白无信号肽及跨膜结构,在5′-UTR的22-51 bp处有一个特殊的铁反应元件(Iron response element, IRE)。同源性和系统进化分析表明,铁蛋白重链在进化上有着较高的保守性。实时定量PCR结果表明,大鲵铁蛋白重链mRNA在各个组织中广泛表达,其中肝脏的表达量高于其他8种组织,表明肝脏是大鲵主要的参与铁储存代谢的器官。成功构建了大鲵铁蛋白重链的重组表达载体pET32a-AdFTH,利用大肠杆菌Escherichia coli BL21表达系统和Ni2+亲和层析方法,获得了纯度较高的重组大鲵铁蛋白,并证实重组大鲵铁蛋白(Recombinant AdFTH protein, rAdFTH)具有氧化和吸收铁离子的功能,为进一步制备AdFTH抗体了解其在大鲵体内的多种作用机制打下坚实的基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小林	西北农林科技大学动物科技学院	120	1293	18.0	31.0
2	胡伟	西北农林科技大学动物科技学院	10	110	6.0	10.0