沉默hMSH2基因表达对紫杉醇耐药的卵巢上皮性癌OC3/TAX300细胞耐药性的影响

• 作者: 李健 李红霞 王爱新
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 关键词: 卵巢肿瘤 MutS同源蛋白2 RNA,小分子干扰 紫杉酚 抗药性,肿瘤 细胞系,肿瘤
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 213-217
• 页数: 5页
• 字数: 4998字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2014.03.013

摘要

目的 应用RNA干扰(RNAi)技术沉默hMSH2基因后,观察其对紫杉醇耐药的卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系OC3/TAX300细胞耐药性的影响.方法 设计靶向沉默耐药基因hMSH2的小分子干扰RNA(siRNA)序列,转染OC3/TAX300细胞(实验组),以转染随机无关序列的细胞为阴性对照组,未转染的细胞为空白对照组.(1)采用实时定量逆转录(RT)-PCR技术和蛋白印迹法分别检测3组细胞中hMSH2 mRNA和蛋白的表达.(2)采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测紫杉醇(2 μg/ml,下同)作用12、24、48、72 h后3组细胞的增殖能力(以细胞生长抑制率表示),流式细胞术检测紫杉醇作用24、48 h后3组细胞的细胞凋亡率和细胞周期比例,透射电镜观察紫杉醇作用48 h后3组细胞的形态学改变.结果 (1)实验组细胞中hMSH2mRNA的相对表达水平为0.004±0.000,低于阴性对照组的0.053±0.006和空白对照组的0.057±0.012(P＜0.05);hMSH2蛋白的相对表达水平为0.19±0.04,低于阴性对照组的1.00±0.07和空白对照组的0.95±0.03(P ＜0.05).(2)紫杉醇作用24、48、72 h后,实验组细胞生长抑制率均明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05);紫杉醇作用24、48 h后,实验组细胞的凋亡率和G2/M期细胞比例均明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05);而阴性对照组细胞的生长抑制率、凋亡率、G2/M期细胞比例分别与空白对照组,差异均无统计学意义(P＞0.05).透射电镜下观察,紫杉醇作用48 h后,实验组大多数细胞可见细胞固缩,部分出现核碎裂和凋亡小体,核仁消失,线粒体明显肿胀,胞质内可见大量空泡状结构;而阴性对照组和空白对照组大多数细胞形态较规则,细胞核位于细胞中央,核仁清晰,线粒体轻度肿胀.结论 RNAi技术沉默紫杉醇耐药的卵巢癌细胞系OC3/TAX300细胞中hMSH2基因的表达后,可逆转OC3/TAX300细胞对紫杉醇的耐药性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红霞	首都医科大学附属北京世纪坛医院妇产科	45	124	6.0	8.0
2	李健	首都医科大学附属北京世纪坛医院妇产科	56	392	10.0	17.0
3	王爱新	北京市房山区妇幼保健院妇产科	1	4	1.0	1.0