基于锚定PCR技术对10种重要农业害虫微卫星DNA位点的筛选及其特征分析

• 作者: 李慧 李洁 沈长朋 褚栋 郎坤玲 陶云荔
• 来源期刊: 生物安全学报
• 关键词: 农业害虫 微卫星 5′锚定PCR技术 克隆 特征分析
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 技术前沿
• 页码范围: 60-65
• 页数: 6页
• 字数: 4047字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1787.2014.01.012

摘要

微卫星DNA广泛存在于真核和原核生物的基因组中，具有多态性丰富、易于检测等特点，在遗传图谱的构建、动植物遗传学育种等方面被广泛应用。利用5′锚定PCR技术对桃小食心虫、桃蛀螟、玉米螟、二点委夜蛾、花蓟马、黄胸蓟马、棕榈蓟马、斑翅果蝇、稻水象甲、扶桑绵粉蚧10种重要农业害虫进行微卫星DNA筛选，并分析各个物种的微卫星DNA的特点。不同物种的阳性克隆率、微卫星比率、克隆效率和冗余率存在不同程度的差异；在核苷酸碱基数目上，主要为二核苷酸重复序列，占重复位点总数的93．2％～100％，三、四核苷酸重复位点较少。在二核苷酸重复位点中， CA/TG重复位点最为丰富，占重复位点总数的89．2％～100％。这与使用的锚定引物密切相关；10种害虫的微卫星DNA平均重复次数为6．7～8．9次，其中玉米螟具有最高的微卫星DNA重复次数（34次）；在序列类型上，完全型序列占上述害虫序列总数的91．0％～100％。5′锚定PCR技术能够快速挖掘害虫的微卫星DNA位点，本研究结果为这些害虫微卫星位点的进一步利用奠定了基础。