牛病毒性腹泻病毒Real-time PCR方法的建立及其应用

• 作者: 孙娜 张淑琴 李鹏 杨勇 温永俊 王凤雪 程世鹏 谭斌 郭利
• 来源期刊: 特产研究
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 病毒检测 荧光定量聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3260字
• 语种: 中文

摘要

本研究在牛病毒性腹泻病毒5'UTR基因的保守区设计并合成了1对引物,建立了可以定量检测牛病毒性腹泻病毒核酸的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法.该方法建立的标准曲线相关系数R2为0.999,扩增效率为95.9％,熔解曲线为单一峰值,可检测到初始模板中4.1×101copies/μL的牛病毒性腹泻病毒核酸,是常规RT-PCR方法敏感性的100倍.该检测方法与猪瘟病毒、传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒3型病毒等其它牛源病毒均不发生交叉反应;批内与批间重复性试验变异系数均小于2.2％.本试验建立的荧光定量PCR检测方法可用于牛病毒性腹泻病毒的临床诊断.同时,应用本方法对临床病例的各组织器官进行了病毒RNA定量检测结果表明,胸腺等淋巴组织的病毒含量最高,证实病毒主要侵害淋巴器官,此研究可为临床病例的病毒分离提供借鉴.