微小RNA-184转染对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞生物学行为的影响

• 作者: 刘成刚 周善璧
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 角膜 微小RNA 血管内皮细胞 转染 基因表达调控 上调 血管形成
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 696-700
• 页数: 5页
• 字数: 5158字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2014.08.006

摘要

背景 研究表明,微小RNA-184(miR-184)可能抑制血管内皮细胞的生物学功能,在眼科研究领域,研究miR-184对新生血管的抑制作用对角膜炎性病变、视网膜和脉络膜新生血管性病变的预防和治疗具有一定的意义. 目的 验证miR-184对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)生物学功能的影响,探讨其对体外新生血管形成的作用和机制.方法 体外培养HUVECs株,将对数生长期的细胞分为4个组.空白对照组细胞培养基中不添加脂质体和RNA分子;空白转染组仅添加脂质体,但无RNA分子;阴性对照组添加hsa-miR-184和脂质体;miR-184转染组添加hsa-miR-184 miRNA mimic和脂质体.采用MTT法检测各组HUVECs的增生值;采用Transwell小室法观察各组HUVECs的迁移数;构建HUVECs的体外三维培养体系,用Matrigel胶体外管腔形成实验观察各组HUVECs的体外形成管腔的数目. 结果 Cy3标记siR-RiboTM脂质体转染后阳性HUVECs呈红色荧光,转染剂浓度＞100 nmol/L时荧光最强,阳性细胞数最多,为最优转染浓度.MiR-184转染组和阴性对照组HUVECs中miR-184的相对表达量分别为1 524.10±385.89和1.00±0.05,差异有统计学意义(t=-7.894,P＜0.01).MiR-184转染组转染后48 h细胞吸光度(A490)值为0.50±0.04,转染后24 h迁移过膜的细胞数为(55.40±5.86)个/视野,分别少于阴性对照组的0.62±0,04和83,40±5.59个/视野,差异均有统计学意义(t=5.639、7.730,均P＜0.01).MiR-184转染组形成管腔样结构分支点数为(13.33±2.08)个/视野,明显少于阴性对照组的(22.00±2.00)个/视野,差异有统计学意义(t=5.511,P＜0.05). 结论 MiR-184转染后能抑制体外培养的HUVECs的生长和迁移能力,减弱HUVECs基质胶上体外管腔的形成能力,可能参与或调控血管的新生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周善璧	重庆医科大学附属第一医院眼科	53	177	6.0	11.0
2	刘成刚	重庆医科大学附属第一医院眼科	7	15	3.0	3.0