猪圆环病毒2型LAMP检测方法的建立与应用

• 作者: 侯义宏 刘波 刘红亮 姚学萍 彭彬 曾辉 杨泽晓 王印 邬旭龙
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 LAMP 检测
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 页码范围: 152-158
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.2
• 语种: 中文

摘要

为建立快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)的LAMP方法,根据GenBank发表的PCV2ORF2基因组保守序列,设计合成4条特异性LAMP引物,通过PCV2ORF2的制备、反应条件的优化、敏感性试验和特异性试验,初步建立了PCV2 LAMP检测方法,并对60份临床检样和6株PCV2进行了检测应用.结果显示,建立的PCV2 LAMP检测方法具有良好的特异性和敏感性,在64C 45 min条件下可扩增出大于134 bp的特异性梯状DNA条带,检测限度可达10 copies/μL;用它对PCV1、PRV、PPV、CSFV和PRRSV的核酸进行扩增,但结果均为阴性.用建立的LAMP方法进行的样品检测结果显示,6株受检PCV2毒株的检出率为100％,60份临床检样PCV2的阳性率为20％(12/60),与PCR方法平行检测的结果相一致.