野生型、超突变子大肠杆菌PFGE分型及大肠杆菌超突变子发生的分子基础

• 作者: 于雪 张海雷 李乾学 李梓萍 苏红艳 陈阳阳 马红霞
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大肠杆菌 超突变子 分子基础
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 页码范围: 183-189
• 页数: 7页
• 分类号: S852.612
• 字数: 5629字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2014.1636

摘要

采用长片段PCR、Western-blotting、质粒互补试验对大肠杆菌野生型和超突变子的MMR重要组分MutS进行了研究。为测定mutS可能的缺失，参照fhlA-mutS-rboS基因簇，在mutS的两侧及中间设计3对引物进行长片段PCR扩增，以K12为模式菌株，其mutS各片段与预期的大小相同，3条片段长度分别为12045，10668，8477 bp；超突变子CE3101和CE5116与 K12相比，3条片段均存在不同程度的缺失：第1条带分别缺失约3500 bp和7000 bp；第2条带分别缺失约3600 bp和7400 bp；第3条带分别缺失约2500 bp和7500 bp。采用Western-blotting方法对大肠杆菌K12、正常菌株、超突变子的MutS蛋白检测结果表明，大肠杆菌K12的条带最为清晰，MutS蛋白最为完整；其次为 CE1112、CE1305、CE2219、CE2307，条带较为清晰，MutS蛋白较为完整；CE5103、CE5120条带较为模糊，CE2205只有1条微弱的条带，MutS 蛋白不完全完整；而超突变子 CE3101、CE5116几乎没有条带，MutS蛋白不完整。以pBR322质粒对照，采用pBR322构建的mutS＋的pGW1811质粒进行质粒互补试验，CE1117、CE3101、CE1305、CE5116、CE6107、CE2313、CE7301、K12等8株菌株转化成功。转入pGW1811前后各株大肠杆菌对利福平（RIF）的突变频率及抑制率测定表明，菌株 CE1117、CE1305、CE6107、CE2313及K12在转入pGW1811前后对RIF的突变频率变化不大（40％）；而突变子CE3101、CE5116、CE7301在转入pGW1811前后对RIF的突变频率变化较大（＞95％）。以上试验结果表明，与野生型大肠杆菌相比，超突变子大肠杆菌的MutS均存在缺陷，说明大肠杆菌超突变子发生的分子基础是其MMR系统重要组分MutS存在缺陷。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马红霞	吉林农业大学动物科学技术学院	149	619	13.0	17.0
2	李乾学	军事医学科学院军事兽医研究所	28	125	7.0	9.0
3	于雪	吉林农业大学动物科学技术学院	3	7	1.0	2.0
4	陈阳阳	军事医学科学院军事兽医研究所	2	7	1.0	2.0
6	张海雷	军事医学科学院军事兽医研究所	3	9	2.0	3.0
9	李梓萍	军事医学科学院军事兽医研究所	1	7	1.0	1.0
10	苏红艳	吉林农业大学动物科学技术学院	3	12	2.0	3.0