头孢菌素脱乙酰酶的重组表达及固定化

• 作者: 叶凤起 沈亚领 王群 金雄熊 陈鑫 魏东芝
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 头孢菌素脱乙酰酶 生物催化 固定化 重组大肠杆菌 7-ACA
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 66-69
• 页数: 4页
• 字数: 3069字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2014.04.012

摘要

本文构建了利用trp启动子表达头孢菌素脱乙酰酶(CAH)的重组大肠杆菌DH5α-pCAH.重组菌在7L发酵罐(装液量2L)中发酵28 h,发酵液OD600达到27,产酶313 kU/L发酵液,粗略估算重组蛋白占细胞总蛋白的70％.发酵生产的重组CAH粗酶液经过硫酸铵分级沉淀分离纯化和超滤除盐浓缩两步操作,纯化倍数为1.44,总酶活回收率56％,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测纯化后蛋白没有明显杂蛋白条带出现.纯化后的CAH共价结合固定在环氧基载体LX-1000EP(c)上,通过对固定化条件的优化最终得到固定化酶比活443 U/g.该固定化酶重复催化50 mL 5％7-ACA底物100次后,酶活没有降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏东芝	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	158	1415	22.0	29.0
2	沈亚领	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	29	312	10.0	17.0
3	王群	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	3	19	2.0	3.0
4	陈鑫		6	12	3.0	3.0
5	金雄熊		1	0	0.0	0.0
6	叶凤起		1	0	0.0	0.0