低丰度基因Real-time PCR相对定量方法的建立

• 作者: 姜华 王晓琳 郭敏 黄聪琳
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 实时定量荧光PCR 低丰度表达基因 低温胁迫 基因表达 标准曲线 相对定量
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 534-537
• 页数: 4页
• 分类号: Q81|Q78
• 语种: 中文

摘要

低丰度基因通常难以通过标准曲线法进行Real-time PCR.通过使用特异引物,对拟南芥低丰度表达基因CIPK7进行了转录水平上的定量分析,成功建立了可检测低丰度基因表达变化的Real-time PCR标准曲线定量方法.扩增CIPK7基因CDS全长,并对PCR产物进行纯化,使用纯化的PCR产物作为标准品,绘制标准曲线,对CIPK7基因的表达进行Real-time PCR分析.与常规Real-time PCR方法进行比较,结果表明,该方法得到的标准曲线,浓度区间范围广,线性关系好,能够很好地适用于低丰度基因的Real-time PCR标准曲线法定量.实验测得低温胁迫下拟南芥CIPK7基因的表达量,随低温处理时间增长,有明显的先升高后降低的变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜华		61	458	10.0	18.0
2	王晓琳		19	60	5.0	7.0
3	郭敏		34	86	5.0	7.0
4	黄聪琳		13	54	5.0	7.0