地塞米松对脂多糖刺激THP-1释放炎性因子的影响及其机制

• 作者: 杨娟 潘莉萍 袁伟 陈美雪
• 来源期刊: 临床肾脏病杂志
• 关键词: 地塞米松 脂多糖 炎症反应 核因子-κB
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 492-497
• 页数: 6页
• 字数: 4847字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2390.2014.08.010

摘要

目的探讨地塞米松(Dexamethasone,DEX)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人外周血单核细胞(human peripheral mononuclear cell,THP-1)炎症因子释放的影响及其机制。方法体外培养人THP-1单核细胞,随机分为对照组(Control)、脂多糖组(LPS)和地塞米松组(DEX)。地塞米松组(1microg/ml)孵育地塞米松2 h后与脂多糖组(0.1μg/ml)均加入脂多糖刺激24 h。应用免疫蛋白印迹电泳法(Western blotting)检测各组细胞总蛋白、糖皮质激素受体(Glucocorticoid recep-tor ,GR)、磷酸化的糖皮质激素受体(p-GR),IκB-α,磷酸化 IκB-α(p-IκB-α),核因子κB (NF-κB),磷酸化核因子κB (p-NF-ΚB),巨噬细胞炎症趋化因子(MCP-1)的水平。用 ELISA 检测各组细胞培养上清中 MCP-1,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的表达水平,用实时定量 PCR(RT-PCR)检测各组细胞MCP-1,TNF-α和IL-6mRNA表达水平。结果 Westernblotting检测显示脂多糖组与对照组相比,脂多糖组 p-GR、p-NF-κB、p-IKB-α和 MCP-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),IκB-α表达明显下降(P<0.05),GR和 NF-KB表达水平无明显差异(P>0.05)；RT-PCR 和 ELASA 检测显示MCP-1,TNF-α和IL-6分泌水平和mRNA 表达水平均明显增高(P<0.05)。与脂多糖组相比,地塞米松组 p-NF-κB,p-IKB-α和 MCP-1蛋白水平表达明显下降,以及 MCP-1,TNF-α和 IL-6分泌和mRNA水平也均表达明显降低,但 p-GR和 IκB-α蛋白表达水平明显增加(P<0.05),但在 NF-κB和 GR表达水平依然无明显差异(P>0.05)。结论地塞米松预处理可通过激活糖皮质激素受体而下调 NF-κB活化从而抑制脂多糖诱导单核细胞THP-1产生的炎症反应。