HPV-16早期基因E1在果蝇细胞S2中的表达和鉴定

• 作者: 刘晓娟 刘琼 曾贝妮 赵晓飞 郭景霞 马正海
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 人乳头瘤病毒16型 E1 S2细胞 表达 pMT/Bip/V5-HisA
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2014.04.0079

摘要

目的:在果蝇S2细胞中表达人乳头瘤病毒16型(HPV-16)E1.方法:PCR扩增HPV-16 E1全长,将PCR产物连接至pMD18-T并测序鉴定,继而将HPV-16 E1构建至果蝇表达载体pMT/Bip/V5-HisA中.大量提取pMT/Bip/V5/His-E1重组表达载体并与筛选质粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞,经杀稻瘟菌素(Blasticidin S)筛选获得具有抗性的稳定转染S2细胞.提取稳转S2细胞基因组DNA,PCR鉴定S2细胞中整合的E1.以终浓度为5μmol/L CdCl2诱导表达,收集上清进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果:双酶切及测序结果显示HPV-16 E1基因已克隆人重组质粒pMT/Bip/V5-E1,PCR和Western blot结果表明HPV-16 E1基因已整合至果蝇S2细胞基因组并稳定表达.结论:获得HPV-16 E1转染的果蝇S2细胞株,该细胞株可持续稳定表达E1蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马正海		57	234	8.0	13.0
2	郭景霞		7	13	2.0	3.0
3	刘晓娟		8	13	2.0	3.0
4	赵晓飞		5	7	2.0	2.0
5	曾贝妮		2	5	1.0	2.0
6	刘琼		1	0	0.0	0.0