半滑舌鳎甲状腺激素受体p基因(TRβ)的克隆与表达分析

• 作者: 刘万军 刘琨 张丽燕 李海龙 董忠典 陈松林
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 半滑舌鳎 甲状腺激素受体β 变态 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1157-1165
• 页数: 9页
• 字数: 5742字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.09.013

摘要

甲状腺激素在鲽形目仔鱼的变态过程中起着重要的作用,而甲状腺激素的生物效应是由甲状腺激素受体(thyroid hormone receptors,TRs)介导的.本研究利用RACE技术克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)TRβ基因的全长,并对其功能进行了生物信息学分析.结果显示,TRβ基因(GenBank登录号:No.KJ499433) cDNA全长为2 345 bp,开放读框(open reading frame,ORF)长1 188bp,编码396个氨基酸,5'-UTR和3'-UTR分别长454和703bp.通过氨基酸序列比对发现,TRβ氨基酸序列铰链区有一段由9个氨基酸残基组成的插入序列,推测这段序列可能为硬骨鱼类TRβ基因所特有的.实时荧光定量PCR技术分析结果显示,TRβ基因在各组织中均有表达,且在肝组织中的表达量显著高于其他组织(P＜0.05);因此推测TRβ基因在半滑舌鳎成鱼各组织中具有多样性的功能,而且其在肝脏的新陈代谢中起到重要的调节作用.在半滑舌鳎仔鱼变态时,TRβ基因的表达量随变态开始而迅速增加,在变态高峰期到达最高.药物处理实验结果显示,正常变态和提前变态的仔鱼TRβ基因的表达水平均随变态开始而迅速上调,而变态被抑制的仔鱼中TRβ基因的表达量则未出现显著变化,表明TRβ是调控半滑舌鳎仔鱼变态过程的重要基因,在半滑舌鳎生长发育早期阶段起较关键作用.本研究为深入解析半滑舌鳎变态的分子机制提供了理论依据和参考.