原代小鼠肝脏细胞的高效分离纯化与培养

• 作者: 付亮 宋陆军 张钰 锁涛 鲁超
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 肝脏细胞 原代细胞培养 分离 纯化 小鼠
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1005-1008
• 分类号: Q95-3|Q813.11|R322.47
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2014.06.002

摘要

目的:建立一种能稳定获得高活力和高纯度原代小鼠肝脏细胞的分离、纯化及培养方法.方法:应用改良的Seglen二步法原位灌注和机械离心分离肝脏细胞,并用改良的高糖DMEM培养基进行培养.台盼蓝拒染法检测接种时肝脏细胞的存活率,倒置显微镜动态观察肝脏细胞形态变化,应用免疫荧光技术对肝脏细胞进行Albumin染色.结果:每只小鼠可获取肝脏细胞的总产量平均为1.35× 106/g体重,肝脏细胞存活率＞90％.倒置显微镜下观察贴壁前肝细胞直径为35.14 μm± 4.35 μm,肝脏细胞在接种后3h基本完成贴壁;肝脏细胞接种后24h,所有肝脏细胞均强阳性表达成熟肝脏细胞标志物Albumin,肝细胞纯度＞95％.结论:改良的分离纯化及培养方法能稳定获得高产量、高活率及高纯度的小鼠肝脏细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	锁涛	复旦大学附属中山医院普外科	48	165	8.0	10.0
2	宋陆军	复旦大学附属中山医院普外科	35	189	5.0	13.0
3	张钰	复旦大学附属中山医院普外科	10	70	4.0	8.0
4	付亮	复旦大学附属中山医院普外科	7	41	3.0	6.0
5	鲁超	复旦大学附属中山医院普外科	8	58	4.0	7.0