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摘要:
目的:建立一种能稳定获得高活力和高纯度原代小鼠肝脏细胞的分离、纯化及培养方法.方法:应用改良的Seglen二步法原位灌注和机械离心分离肝脏细胞,并用改良的高糖DMEM培养基进行培养.台盼蓝拒染法检测接种时肝脏细胞的存活率,倒置显微镜动态观察肝脏细胞形态变化,应用免疫荧光技术对肝脏细胞进行Albumin染色.结果:每只小鼠可获取肝脏细胞的总产量平均为1.35× 106/g体重,肝脏细胞存活率>90%.倒置显微镜下观察贴壁前肝细胞直径为35.14 μm± 4.35 μm,肝脏细胞在接种后3h基本完成贴壁;肝脏细胞接种后24h,所有肝脏细胞均强阳性表达成熟肝脏细胞标志物Albumin,肝细胞纯度>95%.结论:改良的分离纯化及培养方法能稳定获得高产量、高活率及高纯度的小鼠肝脏细胞.
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文献信息
篇名 原代小鼠肝脏细胞的高效分离纯化与培养
来源期刊 现代生物医学进展 学科 医学
关键词 肝脏细胞 原代细胞培养 分离 纯化 小鼠
年,卷(期) 2014,(6) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 1005-1008
页数 分类号 Q95-3|Q813.11|R322.47
字数 语种 中文
DOI 10.13241/j.cnki.pmb.2014.06.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 锁涛 复旦大学附属中山医院普外科 48 165 8.0 10.0
2 宋陆军 复旦大学附属中山医院普外科 35 189 5.0 13.0
3 张钰 复旦大学附属中山医院普外科 10 70 4.0 8.0
4 付亮 复旦大学附属中山医院普外科 7 41 3.0 6.0
5 鲁超 复旦大学附属中山医院普外科 8 58 4.0 7.0
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肝脏细胞
原代细胞培养
分离
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小鼠
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现代生物医学进展
旬刊
1673-6273
23-1544/R
16开
黑龙江省哈尔滨市和兴路32号
14-12
2001
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