猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的分离鉴定及遗传变异分析

• 作者: 于洋 何孔旺 俞正玉 倪艳秀 周忠涛 张雪寒 李彬 汪伟 温立斌 王小敏 茅爱华 郭容利
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离与鉴定 遗传变异
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 页码范围: 232-238
• 页数: 7页
• 分类号: S432.4
• 字数: 4475字
• 语种: 中文

摘要

从江苏某猪繁殖与呼吸综合征( PRRS)发病猪场采集的血清样本中分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV)毒株,对该毒株的生物学特性进行了鉴定,并对其Nsp2和ORF5序列进行测定和序列比对分析。利用细胞传代的方法对PRRSV检测阳性,PPV和PRV检测阴性的猪血清进行病毒分离。通过RT-PCR、CPE和IFA对PRRSV分离毒株进行鉴定,并测定其TCID50。测序获得Nsp2和ORF5基因,并利用DNAStar软件进行序列同源性和进化分析。成功分离获得1株PRRSV毒株,该毒株能够在Marc-145细胞上增殖并产生细胞病变,免疫荧光检测可观察到特异性荧光,TCID50为105.5。 Nsp2序列分析表明,该分离株具有HP-PRRSV 30个氨基酸缺失的基因特征,同时495~516位也存在缺失。分离株ORF5基因与其他参考毒株氨基酸同源性为57.1%~99.5%,与NJ-1106的同源性最高,为99.5%。系统进化树分析表明,该分离株属于北美型,与WUH4、NJ-1106等HP-PRRSV毒株属于同一分支。本试验分离得到一株HP-PRRSV变异毒株,为分析我国PRRSV的遗传变异和防控奠定了基础。